非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Sec61β 抗体 (E-6): sc-393633. 人胰腺 (A) 和小鼠胰腺 (B) 组织提取物中 Sec61β 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Sec61β CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-425892
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Sec61β CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Sec61β基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Sec61β: sc-393633，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Sec61β CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-425892 | 20 µg | $397.00 |
概述
SEC61B 编码 Sec61 易位子（translocon）的 β 亚基，是内质网（ER）膜通道的核心组成部分。该通道介导蛋白质在共翻译过程中导入内质网，并将新生多肽整合进入分泌途径。在小鼠细胞中，Sec61β 支持内质网蛋白生成，与核糖体对接协同，并参与与蛋白折叠及内质网相关降解（ERAD）有关的内质网蛋白稳态（proteostasis）过程。易位子功能的改变可扰乱分泌、膜蛋白稳态以及未折叠蛋白反应（UPR）信号传导，从而将 SEC61 复合体活性与细胞应激适应联系起来。由于分泌途径的完整性是免疫信号、代谢和神经元功能的基础，Sec61b 常被用于研究蛋白稳态失衡和应激相关疾病机制。
Sec61β CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Sec61b基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Sec61b基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Sec61b开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Sec61β蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Sec61b缺失的细胞模型，用于Sec61β信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Sec61β 功能至关重要的 Sec61b 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Sec61b 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Sec61β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Sec61β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Sec61b 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Sec61β HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Sec61β HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Sec61b同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Sec61b靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。