SCP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423231

概要

Sycp1は、減数分裂特異的な構造要素であるシナプトネマ複合体タンパク質1（SCP-1）をコードしており、SCP-1は減数分裂第I前期に相同染色体に沿って組み立てられるシナプトネマ複合体の構成成分です。SCP-1は染色体のシナプシス（対合）を支え、クロスオーバー形成を促進し、精母細胞および卵母細胞で正確な染色体分配に必要な組換えやDNA修復イベントの協調にも関与します。SYCP1依存的なシナプシスの破綻は、減数分裂停止や異数性配偶子の形成と関連しており、不妊や生殖細胞発生の研究において重要です。マウスでは、Sycp1は減数分裂の進行、チェックポイントシグナル伝達、組換え経路の健全性を解明するためのマーカーおよび機構的な要として広く用いられています。

SCP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSycp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sycp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sycp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sycp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCP-1の機能に不可欠なSycp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sycp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSCP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sycp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCP-1 HDRプラスミド（m）および SCP-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSycp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSycp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。