SCML1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407161

Descripción general

SCML1 (sex comb on midleg-like 1) codifica una proteína asociada al grupo Polycomb implicada en la represión transcripcional dependiente de la cromatina y en el mantenimiento de estados epigenéticos. Como miembro de la familia SCM, SCML1 se vincula con la biología de los complejos represores Polycomb, contribuyendo a la regulación de programas de expresión génica guiada por marcas de histonas que influyen en la identidad celular y los procesos del desarrollo. La alteración de la actividad de la vía Polycomb es ampliamente relevante para la diferenciación desregulada y el desequilibrio transcripcional a escala genómica observados en múltiples contextos de enfermedad, lo que convierte a SCML1 en un nodo útil para estudiar mecanismos de control epigenético. El estudio de SCML1 respalda la investigación sobre la organización de la cromatina, el silenciamiento transcripcional y los efectos posteriores sobre redes génicas específicas de linaje.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SCML1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SCML1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SCML1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SCML1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SCML1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SCML1 para la investigación de la señalización de SCML1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SCML1 críticos para la función de SCML1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SCML1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SCML1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SCML1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SCML1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SCML1 (h) y el plásmido HDR SCML1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SCML1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SCML1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.