Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SCCA1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403601-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SCCA1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SCCA1 Double Nickase Plasmid (h) e il SCCA1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SERPINB3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SCCA1 Antibody (8H11): sc-21767
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SCCA1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403601-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SCCA1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403601-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SERPINB3 codifica l’antigene del carcinoma a cellule squamose 1 (SCCA1), una serpin del clade B che agisce principalmente come inibitore intracellulare delle proteasi. SCCA1 modula processi guidati da proteasi legati alla differenziazione epiteliale, alle risposte infiammatorie e alla gestione dello stress cellulare, inclusa la protezione dall’attività delle proteasi lisosomiali e citosoliche. Influenzando la proteostasi e la segnalazione di sopravvivenza cellulare, SERPINB3 è frequentemente studiato in contesti di rimodellamento epiteliale e di microambienti immunitari deregolati. Un’espressione alterata di SCCA1 è stata associata a patologie dell’epitelio squamoso e a fenotipi correlati al cancro, supportandone l’impiego come marcatore meccanicistico in modelli rilevanti per la malattia.
SCCA1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SERPINB3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SERPINB3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SERPINB3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SERPINB3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.