SCAP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401474-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SCAPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SCAP (h) e o Plasmídeo Double Nickase SCAP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SCAP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SCAP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401474-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SCAP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401474-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A SCAP (proteína acompanhante do SREBF) é uma proteína de membrana do retículo endoplasmático que escolta fatores de transcrição SREBP do RE para o complexo de Golgi em resposta à depleção de esteróis, permitindo a ativação proteolítica e a transcrição nuclear de genes do metabolismo lipídico. Por meio da sua interação com proteínas INSIG, a SCAP medeia o controlo por retroalimentação da biossíntese de colesterol e de ácidos gordos e coordena a homeostase lipídica celular com a biogénese de membranas. Este eixo SCAP–SREBP influencia respostas ao stress do RE, o metabolismo de lipoproteínas e a reprogramação metabólica, tornando a SCAP um nó central para o estudo de biologia associada a dislipidemias e de sinalização de crescimento dependente de lípidos em células humanas. A atividade alterada de SCAP/SREBP é frequentemente investigada em contextos de esteatose hepática, processamento de lípidos relevante para a aterosclerose e lipogénese associada ao cancro.
SCAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SCAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SCAP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SCAP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SCAP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.