SARP3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424898

개요

Sfrp5는 분비형 frizzled-related 단백질로서 세포외 Wnt 리간드의 가용성을 조절하고 Wnt/β-카테닌 및 비정형(non-canonical) Wnt 신호를 정교하게 조율하는 SARP3를 암호화합니다. SARP3는 세포 표면에서 수용체–리간드 상호작용을 형성함으로써 발생 과정과 성체 항상성 유지에서 세포 운명 결정, 증식, 조직 재형성에 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서 Sfrp5 활성의 변화는 지방조직 생물학의 이상 조절, 염증, 대사적 표현형과 연관되어 왔으며, 인슐린 감수성과 에너지 균형 연구에서 중요한 표적이 됩니다. 또한 SARP3는 분비 단백질이라는 특성상 기질–면역–상피 미세환경에서의 측분비(paracrine) 신호전달에서 핵심 노드로 작용할 가능성이 큽니다.

SARP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sfrp5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sfrp5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sfrp5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SARP3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SARP3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sfrp5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SARP3 기능에 중요한 Sfrp5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sfrp5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SARP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SARP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sfrp5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SARP3 HDR 플라스미드 (m) 및 SARP3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sfrp5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sfrp5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.