RPTPα CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422515

개요

마우스 Ptpra는 수용체형 단백질 티로신 인산가수분해효소 알파(RPTPα)를 암호화하며, 이는 막관통형 인산가수분해효소로서 Src 패밀리 키나아제 및 관련 기질의 억제성 티로신 잔기를 탈인산화함으로써 신호전달을 조절합니다. 이러한 활성은 인테그린 매개 부착, 초점부착(focal adhesion) 동역학, 세포골격 재구성, 그리고 하위 MAPK/ERK 신호를 통해 증식, 이동, 분화 프로그램 전반에 영향을 미칩니다. RPTPα는 수용체 티로신 키나아제 간 크로스토크에도 관여하며, 신경계 및 면역 관련 맥락에서 신호 임계값을 조정할 수 있습니다. Ptpra 신호가 비정상적으로 조절되면 종양성 형질전환과 침윤성 행동과 관련된 과정과 연관되는 것으로 보고되어, 질병 관련 경로에서 키나아제/인산가수분해효소 균형의 기전을 연구하는 데 유용한 표적 노드가 됩니다.

RPTPα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ptpra 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ptpra 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ptpra의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RPTPα 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RPTPα 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ptpra 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RPTPα 기능에 중요한 Ptpra 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ptpra 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RPTPα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 RPTPα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ptpra 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RPTPα HDR 플라스미드 (m) 및 RPTPα HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ptpra 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ptpra 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.