RPA40 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404594

개요

POLR1C는 RNA 중합효소 I과 RNA 중합효소 III가 공유하는 소단위인 RPA40을 암호화하며, 이들 전사 복합체의 조립과 안정성을 뒷받침합니다. RPA40은 Pol I에 의한 rRNA 합성과 Pol III에 의한 tRNA 및 기타 소형 비암호화 RNA의 전사에 관여함으로써 리보솜 생합성, 단백질 항상성(proteostasis), 그리고 세포 성장 조절에 기여합니다. POLR1C와 연관된 전사 산출이 교란되면 핵소체 기능과 세포 스트레스 반응이 변할 수 있으며, 이는 이 인자가 증식과 분화에 영향을 미치는 경로들과 연결되어 있음을 시사합니다. POLR1C의 변이는 수초와 두개안면 발달에 영향을 미치는 유전 질환과 연관된 바 있어, 인간 생물학에서 Pol I/III의 무결성이 얼마나 중요한지를 강조합니다.

RPA40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 POLR1C 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 POLR1C 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 POLR1C의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RPA40 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RPA40 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 POLR1C 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RPA40 기능에 중요한 POLR1C 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 POLR1C 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RPA40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RPA40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 POLR1C 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RPA40 HDR 플라스미드 (h) 및 RPA40 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 POLR1C 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 POLR1C 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.