RoXaN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422830

Visão geral

Zc3h7b codifica RoXaN, uma proteína que contém dedos de zinco implicada no metabolismo de RNA e na regulação pós-transcricional, com funções descritas na coordenação de complexos ribonucleoproteicos que influenciam a estabilidade e a tradução de mRNAs. Por meio dessas atividades, RoXaN pode afetar programas celulares ligados à proliferação, às respostas ao estresse e à diferenciação, ao moldar a expressão de componentes de vias de sinalização no nível do transcrito. A regulação alterada de fatores de ligação a RNA e de proteínas com dedos de zinco é frequentemente associada a um controle de crescimento desregulado e a fenótipos imunes ou do neurodesenvolvimento, o que torna Zc3h7b um locus útil para estudos mecanísticos do controle da expressão gênica. Em sistemas murinos, a perturbação de Zc3h7b permite investigar como redes de regulação de RNA se cruzam com sinalização e transições de estado celular em contextos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RoXaN (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zc3h7b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zc3h7b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zc3h7b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RoXaN.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zc3h7b para a investigação da sinalização de RoXaN, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zc3h7b críticos para a função RoXaN
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zc3h7b para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RoXaN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RoXaN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zc3h7b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RoXaN Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RoXaN (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zc3h7b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zc3h7b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.