Plásmido Doble Nickase (h) Ron β: sc-400489-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ron β consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ron β (h) y el plásmido de doble nickasa Ron β (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MST1R. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ron α Anticuerpo (C-5): sc-393523
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ron β | sc-400489-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Ron β | sc-400489-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MST1R codifica la tirosina cinasa receptora RON (también conocida como receptor 1 estimulador de macrófagos), un miembro de la familia MET que transduce señales de la proteína estimuladora de macrófagos (MSP). Tras su activación, RON activa vías downstream como PI3K–AKT, RAS–MAPK y la señalización STAT para regular la supervivencia y la migración de células epiteliales, así como programas asociados a la reparación de heridas, y puede modular la polarización de macrófagos y las respuestas inflamatorias. La alteración de la señalización MST1R/RON se ha relacionado con fenotipos de motilidad e invasión celular desregulados y con cambios en la comunicación cruzada entre el tumor y el microambiente en múltiples contextos de cáncer. La isoforma Ron beta aporta una variante biológicamente relevante para analizar resultados de señalización específicos de isoforma y la comunicación entre receptores dentro de redes de la familia MET.
Ron β El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MST1R en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MST1R. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MST1R. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MST1R alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.