RNF148 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427917-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF148O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF148 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RNF148 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rnf148. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF148 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427917-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Rnf148 do camundongo codifica a RNF148, uma ligase E3 de ubiquitina contendo domínio RING finger, implicada na renovação de proteínas dependente de ubiquitina e na regulação da homeostase proteica celular. Como parte do sistema ubiquitina–proteassoma, espera-se que a RNF148 influencie a estabilidade de componentes de vias que controlam a dinâmica de sinalização, respostas ao estresse e processos associados ao ciclo celular. A desregulação da atividade de ligases E3 pode perturbar a proteostase e programas transcricionais a jusante, oferecendo uma ligação mecanística com fenótipos relevantes para a biologia do desenvolvimento e a modelagem de doenças em sistemas mamíferos. O estudo da RNF148 apoia a investigação da regulação dirigida pela ubiquitinação e a identificação de substratos que moldam transições de estado celular.
RNF148 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rnf148 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rnf148. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rnf148. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rnf148 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.