Rnd1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406603

概要

RND1は、非典型的なRhoファミリー小型GTPアーゼであるRnd1をコードしており、Rnd1は恒常的にGTP結合型として存在し、主にアクチン細胞骨格の構築や細胞接着の制御因子として機能します。Rnd1シグナルはRhoA/ROCK依存的な収縮性に拮抗し、ストレスファイバー形成、フォーカルアドヒージョンのダイナミクス、細胞のラウンディングに影響を与え、その下流で細胞移動や神経突起伸長に作用します。インテグリンシグナルや細胞骨格リモデリング経路とのクロストークを通じて、Rnd1は発生および組織恒常性の過程における細胞形態変化の協調に寄与します。RND1の発現変動や経路バランスの破綻は、がん生物学における運動性・浸潤表現型の制御異常や、疾患関連モデルで研究される神経系および血管系プロセスの攪乱と関連づけられています。

Rnd1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRND1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RND1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RND1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Rnd1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Rnd1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RND1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Rnd1の機能に不可欠なRND1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RND1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Rnd1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRnd1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RND1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Rnd1 HDRプラスミド（h）および Rnd1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRND1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRND1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。