Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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RIP140 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435290
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RIP140 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RIP140, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RIP140 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-435290 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Nrip1 de ratón codifica RIP140 (NRIP1), un corregulador de receptores nucleares dependiente de ligando que actúa predominantemente como correpresor transcripcional al reclutar complejos modificadores de la cromatina, como ensamblajes que contienen HDAC. RIP140 integra señales de receptores nucleares, incluidos PPAR, ER, TR y RXR, para modular programas génicos que controlan la función mitocondrial, el metabolismo oxidativo, la diferenciación de adipocitos y las salidas transcripcionales inflamatorias. A través de estas vías, Nrip1 se utiliza ampliamente para estudiar la homeostasis metabólica, el gasto energético y las respuestas inflamatorias mediadas por macrófagos. La desregulación del control transcripcional dependiente de RIP140 se ha asociado con fenotipos relevantes para la obesidad, la resistencia a la insulina, la biología del hígado graso y modelos tumorales sensibles a hormonas en entornos de investigación preclínica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RIP140 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nrip1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nrip1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nrip1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RIP140.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nrip1 para la investigación de la señalización de RIP140, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Nrip1 críticos para la función de RIP140
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nrip1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RIP140 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RIP140 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nrip1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RIP140 (m) y el plásmido HDR RIP140 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nrip1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nrip1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.