
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
RIP140 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-401787-ACT | 20 µg | $397.00 |
NRIP1는 RIP140을 암호화하는 유전자로, 핵 수용체 및 기타 DNA 결합 전사인자와 상호작용하여 대사 및 내분비 프로그램을 조율함으로써 유전자 발현을 조절하는 전사 코조절인자입니다. RIP140은 표적 프로모터에서 염색질 의존적 활성화 또는 억제를 형성함으로써 지방분화, 미토콘드리아 기능, 지질 및 포도당 항상성, 염증성 신호전달에 영향을 줍니다. 에스트로겐 수용체 신호전달, PPAR 의존적 전사, 그리고 더 광범위한 코액티베이터/코리프레서 네트워크 등의 경로와의 크로스토크를 통해 RIP140은 영양 신호를 세포 분화 및 스트레스 반응과 통합하는 데 기여합니다. 문헌에서는 NRIP1/RIP140 활성의 이상 조절이 대사 기능 이상, 생식 관련 표현형, 그리고 여러 질환 관련 맥락에서 관찰되는 전사 상태 변화와 연관되는 것으로 보고되어, 기전 연구에서의 활용 근거를 뒷받침합니다.
RIP140 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 NRIP1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
RIP140 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 NRIP1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 NRIP1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 RIP140 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 NRIP1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 RIP140 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 NRIP1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 RIP140 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.