RHAMM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420881
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RHAMM O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RHAMM, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RHAMM Anticorpo (H-8): sc-515221
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RHAMM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420881 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hmmr codifica a RHAMM (receptor de motilidade mediada por hialuronano), uma proteína que interage com microtúbulos e com o hialuronano e que coordena a organização do citoesqueleto, a função do centrossomo e a montagem do fuso mitótico. A RHAMM contribui para a migração e a proliferação celulares ao integrar sinais da matriz extracelular com a dinâmica intracelular dos microtúbulos e com vias de sinalização ligadas à motilidade e à progressão do ciclo celular. Em sistemas murinos, a atividade alterada de RHAMM tem sido associada a mitose desregulada, instabilidade genômica e processos aberrantes de remodelamento tecidual relevantes para a biologia do câncer e para microambientes inflamatórios. Essas características tornam o Hmmr um alvo útil para investigar como a sinalização por hialuronano se articula com a regulação do fuso e com programas de motilidade.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RHAMM (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hmmr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hmmr, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hmmr na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RHAMM.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hmmr para a investigação da sinalização de RHAMM, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hmmr críticos para a função RHAMM
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hmmr para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RHAMM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RHAMM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hmmr. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RHAMM Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RHAMM (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hmmr para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hmmr definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.