RGS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-404102-KO-2

概要

RGS6（regulator of G protein signaling 6）は、活性化したGαサブユニット上でのGTP加水分解を促進し、GPCR（Gタンパク質共役型受容体）によるシグナル伝達を終結させるヒトRGSファミリータンパク質である。cAMP/PKAやカルシウム依存性シグナルなどのセカンドメッセンジャー経路を調節し、神経細胞の興奮性、心臓の電気生理学的特性、神経伝達物質に対する応答を形成する。RGS6はアポトーシスや酸化ストレス応答の制御にも関与するとされ、その機能異常は神経変性過程、不整脈関連シグナル、腫瘍関連経路といった文脈で研究されている。GPCRシグナルの終結因子として、RGS6は受容体活性化下流の経路ダイナミクスを解析し、MAPKやストレス応答ネットワークとのクロストークをマッピングする上で有用な結節点となる。

RGS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるRGS6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RGS6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RGS6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RGS6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RGS6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RGS6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RGS6の機能に不可欠なRGS6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RGS6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RGS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRGS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RGS6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RGS6 HDRプラスミド（h）および RGS6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRGS6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRGS6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。