Rfp2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403870

개요

TRIM13은 인간의 RING finger E3 유비퀴틴 리가아제인 Rfp2를 암호화하며, Rfp2는 주로 소포체(ER)에 연관된 단백질로서 유비퀴틴 의존적 단백질 항상성(proteostasis)과 소포체 품질 관리(ER quality control)에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. Rfp2는 기질 단백질의 유비퀴틴화를 촉진함으로써 단백질 분해(turnover)와 스트레스 반응성 신호 전달을 조절하는 데 참여하며, 이로 인해 ER-연관 분해(ER-associated degradation), 세포사멸 조절, 선천면역 경로 조절과 같은 과정과 연결됩니다. TRIM13의 발현 또는 활성 변화는 세포 스트레스 적응 및 유비퀴틴 신호의 이상 조절 맥락에서 연구되어 왔으며, 이는 종양성(oncogenic) 표현형과 신경퇴행성 단백질병증(proteinopathies)에 기여할 수 있습니다. TRIM 패밀리의 일원으로서 Rfp2는 인간 세포에서 유비퀴틴 경로의 연결 구조(wiring)와 소기관 국소화 신호 전달을 해부적으로 분석하기에 다루기 용이한 표적 지점을 제공합니다.

Rfp2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRIM13 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRIM13 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRIM13의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rfp2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rfp2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRIM13 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rfp2 기능에 중요한 TRIM13 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRIM13 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rfp2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Rfp2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRIM13 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rfp2 HDR 플라스미드 (h) 및 Rfp2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRIM13 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRIM13 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.