RFLAT-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404618

Visão geral

KLF13 codifica o fator de transcrição RFLAT-1, uma proteína de dedo de zinco do tipo Krüppel que se liga a elementos promotores ricos em GC para modular programas de expressão gênica que controlam a ativação de linfócitos e a sinalização inflamatória. O RFLAT-1 tem sido associado à regulação da transcrição de quimiocinas e citocinas e pode interagir com vias como as respostas transcricionais dependentes de NF-κB, moldando a diferenciação de células imunes e seus estados de ativação. A atividade desregulada de KLF13/RFLAT-1 tem sido estudada em contextos de patologia mediada pelo sistema imune e de assinaturas gênicas inflamatórias alteradas, bem como em redes transcricionais que contribuem para proliferação e sobrevivência aberrantes em tipos celulares relevantes para doenças. Essas propriedades tornam o KLF13 um nó útil para dissecar a regulação transcricional responsiva a estímulos e os circuitos gênicos imunes em sistemas modelo humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RFLAT-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLF13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLF13, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLF13 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RFLAT-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLF13 para a investigação da sinalização de RFLAT-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLF13 críticos para a função RFLAT-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLF13 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RFLAT-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RFLAT-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLF13. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RFLAT-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RFLAT-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLF13 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLF13 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.