Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rev-erbα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401211-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rev-erbαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rev-erbα (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rev-erbα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NR1D1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rev-erbα Anticorpo (E-12): sc-393215
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rev-erbα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401211-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rev-erbα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401211-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NR1D1 codifica o receptor nuclear Rev-erbα, um repressor transcricional de ligação ao heme que integra a temporização circadiana ao metabolismo celular. O Rev-erbα modula o circuito central do relógio biológico ao reprimir genes-alvo envolvidos no eixo BMAL1/ARNTL e coordena a homeostase de lipídios e glicose por meio de interações com reguladores metabólicos e com a sinalização de receptores nucleares. Por regular programas gênicos inflamatórios e vias mitocondriais e metabólicas, a atividade de NR1D1 é amplamente estudada em contextos que relacionam a desregulação circadiana à disfunção metabólica e imune. Alterações na função de NR1D1/Rev-erbα têm sido associadas na literatura de pesquisa a fenótipos relacionados à síndrome metabólica, processos neurocomportamentais e biologia tumoral, reforçando seu valor em estudos mecanísticos.
Rev-erbα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NR1D1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NR1D1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NR1D1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NR1D1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.