REP-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417782

개요

CHML은 Rab 에스코트 단백질 2(REP-2)를 암호화하며, REP-2는 새로 합성된 Rab GTPase에 결합해 샤페론으로 작용하고 이를 Rab 제라닐제라닐전이효소(Rab geranylgeranyltransferase)에 제시하여 프레닐화(prenylation)를 유도합니다. 프레닐화는 막 결합에 필요한 지질성 변형입니다. 이러한 Rab 성숙 단계에서 REP-2는 엔도좀 및 골지체 수송, 엑소사이토시스, 자가포식 관련 막 역학을 포함한 소포성 수송 경로를 지원합니다. Rab의 프레닐화 또는 Rab 사이클링이 교란되면 소기관 정체성과 세포내 화물 분류가 흐트러질 수 있으며, 이는 신경퇴행, 망막 질환, 그리고 더 폭넓은 수송 이상 관련 세포 스트레스 표현형에서 흔히 연관되는 과정입니다. 또한 CHML은 Rab 의존적 신호전달과 막 재형성이 면역세포 기능 및 암세포 생물학과 교차하는 맥락에서도 연구됩니다.

REP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CHML 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CHML 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CHML의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 REP-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 REP-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CHML 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• REP-2 기능에 중요한 CHML 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CHML 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• REP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 REP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CHML 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  REP-2 HDR 플라스미드 (h) 및 REP-2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CHML 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CHML 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.