Plasmide CRISPR/Cas9 KO REM (m): sc-422645
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- REM Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique REM, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: REM Antibody (24E4): sc-58472
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO REM (m) | sc-422645 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Rem1** code **REM**, un membre de la famille **RGK** des petites protéines liant le GTP, qui module l’excitabilité membranaire en régulant le trafic et le gating des canaux Ca2+ voltage-dépendants. Par ses interactions avec les sous-unités β des canaux et des régulateurs du cytosquelette, REM influence la signalisation dépendante du Ca2+, le couplage excitation–contraction et des programmes transcriptionnels dépendants de l’activité. L’expression de Rem1 répond à la stimulation cellulaire et a été associée au contrôle de la croissance et de la différenciation cellulaires dans des tissus électriquement actifs, ce qui soutient des recherches en électrophysiologie cardiaque, en signalisation neuronale et en fonction du muscle lisse vasculaire. Une signalisation RGK dérégulée est étudiée dans le contexte de mécanismes arythmogènes, de neuroadaptation et de processus de remodelage, où des modifications de l’influx de Ca2+ affectent des voies en aval.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO REM (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Rem1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Rem1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Rem1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine REM.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Rem1 pour l'étude de la signalisation de REM, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Rem1 essentiels à la fonction de REM
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Rem1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le REM plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le REM plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Rem1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le REM plasmide HDR (m) et le REM (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Rem1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Rem1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.