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REEP1双切口酶质粒(h) | sc-407088-NIC | 20 µg | $410.00 |
REEP1(受体表达增强蛋白 1)是一种内质网(ER)膜蛋白,参与塑造内质网小管并维持神经元中内质网的结构架构。它参与内质网与微管的相互作用,支持细胞内膜运输和神经突起生长;这些过程与轴突维持和突触功能密切相关。REEP1 活性异常与神经退行性表型有关,其中最突出的是遗传性痉挛性截瘫,凸显其在维持皮质脊髓束神经元完整性的相关通路中的重要性。因此,在人源细胞模型中研究 REEP1 有助于探索内质网形态发生、蛋白质稳态以及细胞器动力学等过程。
REEP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 REEP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对REEP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏REEP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了REEP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。