RBM7 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-408808-NIC

RBM7은 핵 엑소좀 표적화(NEXT) 복합체의 핵심 구성 요소로 기능하는 RNA 결합 단백질을 암호화하며, RNA 인식을 RNA 엑소좀의 모집(recruitment)과 결합시켜 수명이 짧거나 비정상적인 핵 전사체를 분해하도록 합니다. RBM7은 광범위 전사 산물(pervasive transcription products), 프로모터 상류 전사체(promoter-upstream transcripts), 비암호화 RNA를 조절함으로써 RNA 품질 관리, 전사 항상성, 그리고 유전체 무결성에 기여합니다. RBM7 의존적 RNA 감시는 RNA 중합효소 II 전사, RNA 가공, 세포 스트레스 반응과 같은 과정들과도 교차합니다. RBM7이 관여하는 RNA 대사 이상 및 핵 RNA 분해 경로의 손상은 전사체 불안정성이 공통된 특징으로 나타나는 암과 신경퇴행성 질환의 기전 연구와 관련이 있습니다.

RBM7 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 RBM7 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 RBM7 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 RBM7의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, RBM7 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.