Plasmide Double Nickase (h) RBM3: sc-406296-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM3 Double Nickase (h) et le plasmide RBM3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RBM3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RBM3 Antibody (A-7): sc-390139
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM3 | sc-406296-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RBM3 | sc-406296-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM3 (RNA binding motif protein 3) est une protéine de liaison à l’ARN induite par le froid (« cold-shock ») qui module la régulation post-transcriptionnelle de l’expression génique en influençant la stabilité des ARNm, l’épissage et la traduction. Elle soutient les réponses adaptatives au stress cellulaire et a été impliquée dans le contrôle de la progression du cycle cellulaire, de l’apoptose et de la protéostasie via des effets étendus sur le métabolisme de l’ARN. Une expression altérée de RBM3 a été associée à des contextes d’hypoxie, à des programmes liés à la neuroprotection et à la biologie tumorale, où elle peut corréler avec des variations de prolifération et de tolérance au stress. Ces propriétés font de RBM3 un nœud utile pour étudier les réseaux de régulation de l’ARN qui façonnent les décisions de destinée cellulaire en conditions physiologiques et de stress.
RBM3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBM3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBM3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBM3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBM3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.