Ras-GRF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422605

개요

Rasgrf1는 Ras-GRF1을 암호화하는 유전자로, 칼슘/칼모듈린에 의해 조절되는 구아닌 뉴클레오타이드 교환인자(GEF)이며 Ras 계열 GTPase를 활성화하고 신경세포 활동을 하위 MAPK/ERK 신호전달과 연결합니다. 생쥐에서 Ras-GRF1은 Ras 및 Rap 연관 경로의 조절을 통해 시냅스 가소성, 학습과 기억, 그리고 활동 의존적 유전자 발현에 기여하며, 일부 조직에서는 인슐린/IGF 관련 신호전달 및 성장 조절에도 추가적인 역할을 합니다. 이러한 신호전달 결절을 통해 Ras-GRF1은 세포 증식, 분화, 세포골격 역학에 영향을 미치므로, 신경발달 표현형 및 조절 이상이 있는 Ras 경로 생물학 연구와 관련성이 큽니다. Ras-GRF1 기능 변화는 비정상적 신경 신호전달 및 종양성 경로 재구성의 맥락에서 조사되어 왔으며, 경로 분석을 위한 기전적 접근 지점으로 활용될 수 있음을 뒷받침합니다.

Ras-GRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rasgrf1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rasgrf1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rasgrf1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ras-GRF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ras-GRF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rasgrf1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ras-GRF1 기능에 중요한 Rasgrf1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rasgrf1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ras-GRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Ras-GRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rasgrf1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ras-GRF1 HDR 플라스미드 (m) 및 Ras-GRF1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rasgrf1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rasgrf1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.