Plásmido Doble Nickase (h) Ran BP-M: sc-403548-NIC

RANBP9 codifica Ran BP-M, una proteína adaptadora de unión a Ran que actúa como andamiaje dentro de complejos multiproteicos, conectando el transporte nucleocitoplasmático con la transducción de señales y la regulación del citoesqueleto. Se ha implicado a Ran BP-M en la coordinación de interacciones proteína–proteína que influyen en el control transcripcional, las respuestas al daño del ADN y procesos asociados al ciclo celular. A través de estas funciones, RANBP9 puede modular vías relevantes para la adaptación al estrés celular y la proteostasis, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar redes reguladoras dependientes del contexto. La expresión alterada de RANBP9 o cambios en la composición de sus complejos se han asociado con fenotipos observados en investigaciones de oncología y neurobiología, lo que respalda su estudio en sistemas modelo relevantes para enfermedades.

Ran BP-M El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RANBP9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RANBP9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RANBP9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RANBP9 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.