Ral B CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-425679

概述

Ralb 编码小型 GTP 酶 Ral B。Ral B 是一种类似 Ras 的分子开关，可在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间循环切换，从而调控膜运输与细胞骨架重塑。Ral B 通过胞吐体（exocyst）复合物、RalBP1 等效应蛋白传递信号，以控制囊泡停靠、内吞作用、细胞极性和胞质分裂；同时，它还可通过与 TBK1 激活相关的通路与应激及先天免疫信号发生串联。通过这些过程，Ral B 影响细胞增殖、迁移与存活等程序，这些程序常在致癌性 Ras 网络输出及肿瘤细胞侵袭的研究背景下被重点关注。在小鼠模型中，对 Ralb 的扰动有助于机制性研究与癌症生物学及炎症相关表型有关的小型 GTP 酶信号节点。

Ral B CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ralb基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ralb基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ralb开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Ral B蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Ralb缺失的细胞模型，用于Ral B信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Ral B 功能至关重要的 Ralb 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Ralb 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Ral B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Ral B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ralb 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Ral B HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Ral B HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ralb同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ralb靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。