Ral A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403983

개요

RALA는 Ras 관련 소형 GTPase인 RalA를 암호화하며, GDP 결합 상태와 GTP 결합 상태 사이를 순환하면서 Ras 계열 신호 입력의 하위에서 신호전달을 조율합니다. 활성화된 RalA는 엑소시스트(exocyst) 복합체와 RalBP1 같은 효과기를 통해 소포 수송, 극성 외배출, 엔도사이토시스, 액틴 세포골격 재구성을 조절하여, 막 역학을 세포 이동 및 증식과 연결합니다. RalA 신호는 MAPK 및 PI3K 관련 네트워크와도 교차하며, 세포질분열과 미토콘드리아 항상성의 조절에도 기여합니다. RALA 활성이 비정상적으로 조절되면 종양성 신호전달 환경 및 변화된 세포 운동성 프로그램과 연관되는 것으로 보고되어, 종양 생물학과 전이 관련 경로의 기전 연구에서 중요한 표적이 됩니다.

Ral A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RALA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RALA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RALA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ral A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ral A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RALA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ral A 기능에 중요한 RALA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RALA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ral A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Ral A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RALA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ral A HDR 플라스미드 (h) 및 Ral A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RALA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RALA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.