RADX CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409991

概要

CXorf57は、一本鎖DNA結合因子であるRADXをコードしており、複製フォークの動態を調節し、S期におけるゲノム安定性の維持に寄与します。RADXは、停止した複製フォークでのRAD51のロードを拮抗的に抑制し、相同組換えを方向づけるとともに、複製ストレス応答を協調的に制御します。これらの機能を通じて、複製フォークの完全性の保持、異常な組換えの抑制、ならびにDNA損傷シグナル伝達経路の制御に貢献します。RADXに関連するフォーク保護と修復のバランスの破綻は、がん生物学やその他の複製ストレス関連疾患モデルで観察されるゲノム不安定性表現型の基盤機構と関係しています。

RADX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCXorf57遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CXorf57内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CXorf57のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RADXタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RADXシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CXorf57欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RADXの機能に不可欠なCXorf57エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CXorf57ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RADX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRADX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CXorf57遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RADX HDRプラスミド（h）および RADX HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCXorf57ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCXorf57標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。