Radical Fringe CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422659

개요

Rfng는 골지체에 위치하는 β1,3-N-아세틸글루코사미닐전이효소인 Radical Fringe를 암호화하며, Notch 수용체의 EGF-유사 반복에 존재하는 O-푸코스 잔기를 변형함으로써 리간드 의존적 Notch 신호전달의 강도를 미세 조절합니다. Radical Fringe는 상황(맥락)에 따라 Delta-like과의 상호작용은 강화하고 Jagged/Serrate와의 상호작용은 조절함으로써, 발생 과정 및 성체의 줄기/전구세포 구획에서 세포 운명 결정, 경계 형성, 조직 패터닝을 조절하는 데 기여합니다. Fringe 매개 당화가 변화하면 Notch 경로의 출력과, 증식 및 분화를 조절하는 하위 전사 프로그램이 이동(변화)할 수 있습니다. Notch 신호의 이상 조절은 다양한 질병 관련 과정 전반에 관여하므로, Rfng는 마우스 세포 및 생체 내 모델에서 Notch 구동 표현형을 규명하는 데 유용한 분석 지점이 됩니다.

Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rfng 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rfng 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rfng의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Radical Fringe 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Radical Fringe 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rfng 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Radical Fringe 기능에 중요한 Rfng 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rfng 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rfng 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Radical Fringe HDR 플라스미드 (m) 및 Radical Fringe HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rfng 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rfng 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.