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Rac 1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400175-LAC | 200 µl | $455.00 |
RAC1 编码小型 GTP 酶 Rac1,它属于 Rho 家族的分子开关,通过在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间循环切换,协调肌动蛋白细胞骨架重塑、膜褶皱(membrane ruffling)以及细胞极性。通过 PAKs 和 WAVE/Arp2/3 复合体等下游效应分子,Rac1 调控黏附动态、囊泡运输与定向细胞迁移,并与 PI3K 信号通路及 NADPH 氧化酶依赖的 ROS(活性氧)生成相互衔接。RAC1 活性会影响增殖、生存及转录程序,整合来自生长因子受体与整合素的信号输入。RAC1 信号失调已被认为与多种疾病相关过程有关,包括侵袭性表型、免疫细胞运动能力改变以及异常的炎症信号,因此在机制性细胞生物学与通路研究中常被重点关注。
Rac 1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RAC1 表达。
Rac 1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在RAC1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Rac 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 RAC1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。