Rab GDI α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404659

개요

GDI1은 Rab GDP dissociation inhibitor alpha(Rab GDI α)를 암호화하며, 프레닐화된 Rab GTPase에 결합해 이들이 막에서 추출되고, 용해 상태로 유지되며, 공여 구획과 수용 구획 사이에서 재활용되도록 조절하는 세포질 샤페론입니다. Rab의 이용 가능성과 세포 내 위치를 조절함으로써 Rab GDI α는 엔도사이토시스 및 분비 경로 전반에서 소포의 출아, 수송, 융합을 조율하고, 소기관 정체성과 화물 분류를 뒷받침합니다. GDI1의 기능이 교란되면 시냅스 소포 순환과 뉴런 항상성에 필수적인 Rab 의존적 수송 네트워크가 흐트러져, 변화된 막 수송이 신경발달 및 신경계 질환 표현형과 연결됩니다. 소형 GTPase 조절의 핵심 노드로서 GDI1은 엔도좀 역학, 골지체-세포막 수송, 시냅스 기능의 맥락에서 자주 연구됩니다.

Rab GDI α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GDI1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GDI1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GDI1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rab GDI α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rab GDI α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GDI1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rab GDI α 기능에 중요한 GDI1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GDI1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rab GDI α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Rab GDI α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GDI1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rab GDI α HDR 플라스미드 (h) 및 Rab GDI α HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GDI1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GDI1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.