PYGL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430989

개요

Mouse Pygl은 간 글리코겐 포스포릴레이스(PYGL)를 암호화하며, 이는 글리코겐을 동원하는 속도 제한 효소로서 인산분해적 절단(phosphorolytic cleavage)을 촉매해 포도당-1-인산을 생성하고, 이를 통해 하위의 해당과정 및 포도당 항상성 유지에 기여합니다. PYGL 활성은 호르몬 신호와 영양 감지 입력과 연동되어 간의 글리코겐분해를 조절하며, 탄수화물 가용성을 중심 탄소 대사 경로를 통한 대사 플럭스와 연결합니다. PYGL 기능의 교란은 글리코겐 저장과 이용을 변화시키고, 글리코겐 대사의 선천성 이상과도 관련되므로 간세포 및 개체 수준 모델에서 대사 적응과 에너지 균형을 연구하는 데 유용한 표적입니다. 따라서 Pygl은 간 대사 프로그래밍, 공복 반응, 그리고 시스템 수준의 포도당 대사 조절에 관한 연구에 폭넓게 정보를 제공합니다.

PYGL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pygl 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pygl 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pygl의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PYGL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PYGL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pygl 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PYGL 기능에 중요한 Pygl 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pygl 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PYGL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PYGL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pygl 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PYGL HDR 플라스미드 (m) 및 PYGL HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pygl 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pygl 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.