Pumilio 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406309

개요

PUM1은 3′ UTR에 존재하는 Pumilio 반응 요소(Pumilio response elements)를 인식하여 mRNA의 안정성, 세포 내 위치, 번역을 조절하는 보존된 RNA 결합 단백질인 Pumilio 1을 암호화한다. PUM1은 전사 후 조절 복합체를 형성함으로써 세포주기 진행, 분화, 그리고 스트레스 반응성 전사체 리모델링을 제어하는 유전자 발현 프로그램을 구성한다. Pumilio 1은 번역 억제, mRNA 분해, microRNA 매개 조절과의 협조를 포함한 RNA 대사 경로에 관여한다. PUM1 활성이 비정상적으로 조절되면 단백질 항상성(proteostasis)과 유전체 유지 프로그램의 변화와 연관되는 것으로 보고되었으며, 신경발달 및 신경퇴행성 표현형은 물론 암과 연관된 RNA 조절 네트워크 맥락에서도 연구되어 왔다.

Pumilio 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PUM1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PUM1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PUM1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Pumilio 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Pumilio 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PUM1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Pumilio 1 기능에 중요한 PUM1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PUM1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Pumilio 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Pumilio 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PUM1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Pumilio 1 HDR 플라스미드 (h) 및 Pumilio 1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PUM1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PUM1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.