Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PTH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401280
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PTH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PTH Anticorpo (H-7): sc-398856
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PTH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401280 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O hormônio paratireoideano (PTH) é um peptídeo endócrino produzido principalmente pelas células principais das paratireoides, que mantém a homeostase sistêmica de cálcio e fosfato ao atuar no rim e no osso. Ao se ligar ao PTH1R, o PTH ativa as vias de sinalização Gs/cAMP/PKA e Gq/PLC, modulando o acoplamento entre osteoblastos e osteoclastos e o manuseio tubular renal de cálcio e fosfato, incluindo a regulação da ativação da vitamina D. A sinalização induzida por PTH se integra a redes do metabolismo mineral, como as vias FGF23–Klotho, e influencia programas transcricionais a jusante em tipos celulares esqueléticos e renais. A expressão ou a sinalização desregulada de PTH está associada a distúrbios do equilíbrio de íons minerais e da remodelação óssea, oferecendo um ponto de partida útil para estudos mecanísticos em modelos de endocrinologia, biologia esquelética e nefrologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PTH (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PTH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PTH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PTH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PTH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PTH para a investigação da sinalização de PTH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PTH críticos para a função PTH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PTH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PTH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PTH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PTH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PTH Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PTH (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PTH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PTH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.