PT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417829-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PT (h) e o Plasmídeo Double Nickase PT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PTMA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417829-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene humano PTMA codifica a protimosina alfa, uma pequena proteína nuclear ácida implicada na organização da cromatina, na ligação a histonas e na regulação de programas de transcrição associados à proliferação e à sobrevivência celular. O PTMA participa de processos como o controle da apoptose, respostas ao estresse oxidativo e progressão do ciclo celular, e tem sido relacionado a vias envolvendo a sinalização de NF-κB e redes mais amplas de expressão gênica induzida por estresse. A expressão desregulada de PTMA foi relatada em múltiplos contextos de câncer e em cenários relacionados ao sistema imune, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de biologia tumoral, inflamação e regulação do destino celular. Como fator predominantemente nuclear, o PTMA também é utilizado para investigar como proteínas associadas à cromatina influenciam a estabilidade do genoma e a plasticidade transcricional.
PT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PTMA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PTMA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PTMA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PTMA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.