PSIP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404589
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PSIP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PSIP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PSIP1 Anticorpo (3F7): sc-101087
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PSIP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404589 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PSIP1 (também conhecido como LEDGF/p75) é um cofator transcricional associado à cromatina que se liga a genes ativos marcados por H3K36me3 por meio do seu domínio PWWP e ajuda a organizar o alongamento da transcrição, o processamento de RNA e as respostas a danos no DNA. Ao interagir com fatores envolvidos no estresse de replicação e no reparo de quebras de dupla fita, o PSIP1 contribui para a estabilidade do genoma e a sobrevivência celular em condições genotóxicas. O PSIP1 também é reconhecido por ancorar a integrase viral à cromatina, influenciando a seleção de sítios de integração, e participa de programas regulatórios ligados à transcrição oncogênica e à sinalização de estresse celular. A desregulação das interações do PSIP1 com a cromatina tem sido estudada em contextos como malignidades hematológicas e outros cânceres, nos quais o controle transcricional e o equilíbrio das vias de reparo estão alterados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PSIP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PSIP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PSIP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PSIP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PSIP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PSIP1 para a investigação da sinalização de PSIP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PSIP1 críticos para a função PSIP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PSIP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PSIP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PSIP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PSIP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PSIP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PSIP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PSIP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PSIP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.