PSD-95 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400830

개요

DLG4는 PSD-95를 암호화하는 유전자로, PSD-95는 시냅스후 밀도(postsynaptic density)의 핵심 스캐폴드 단백질로서 NMDA 및 AMPA 수용체 복합체를 고정하고 군집화하며 이를 하위 신호전달과 연결함으로써 글루타메이트성 시냅스를 조직합니다. PSD-95는 PDZ, SH3, GK 도메인을 통해 시냅스 수용체 수송, 활동 의존적 가소성, 세포골격 재형성을 조율하고, 흥분성 신경전달과 스파인(spine) 성숙을 조절하는 경로들을 통합합니다. DLG4/PSD-95의 기능 및 시냅스 내 위치 이상은 회로 형성과 흥분–억제 균형에서의 역할을 반영하듯 신경발달 및 신경정신질환 관련 표현형과 연관되어 온 것으로 보고되어 왔습니다. 허브 단백질로서 PSD-95는 학습과 기억, 시냅스 스케일링(synaptic scaling), 신경 시냅스에서의 단백질 항상성(proteostasis) 기전 연구에서 자주 다뤄집니다.

PSD-95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DLG4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DLG4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DLG4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PSD-95 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PSD-95 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DLG4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PSD-95 기능에 중요한 DLG4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DLG4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PSD-95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PSD-95 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DLG4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PSD-95 HDR 플라스미드 (h) 및 PSD-95 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DLG4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DLG4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.