Plasmide CRISPR/Cas9 KO PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h): sc-400448

Présentation

KLK3 code la peptidase 3 apparentée aux kallikréines (PSA), une protéase à sérine sécrétée, produite principalement par les cellules épithéliales luminales de la prostate et libérée dans le liquide séminal. Le PSA participe au traitement protéolytique des protéines du plasma séminal et contribue à des réseaux extracellulaires de protéases qui modulent le clivage des substrats, le renouvellement des protéines et la signalisation du microenvironnement. Son expression est fortement régulée par la signalisation du récepteur des androgènes, reliant la transcription de KLK3 au contrôle hormonal de la différenciation de l’épithélium prostatique et des programmes sécrétoires. Une expression dérégulée de KLK3 et une activité du PSA altérée sont étroitement associées à la pathobiologie prostatique et sont largement utilisées comme indicateurs moléculaires dans les études de la réponse aux androgènes, de la progression tumorale et du remodelage du microenvironnement.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KLK3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KLK3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KLK3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KLK3 pour l'étude de la signalisation de PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de KLK3 essentiels à la fonction de PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KLK3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KLK3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen plasmide HDR (h) et le PSA/KLK3/Kallikrein 3/Prostate Specific Antigen (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KLK3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KLK3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.