PRX III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401730

Visão geral

PRDX3 codifica a peroxirredoxina III (PRX III), uma peroxidase dependente de tioredoxina localizada nas mitocôndrias, que detoxifica o peróxido de hidrogênio e os hidroperóxidos lipídicos para preservar o equilíbrio redox. Ao tamponar as espécies reativas de oxigênio mitocondriais, a PRX III sustenta a fosforilação oxidativa, limita o dano oxidativo ao DNA mitocondrial e às proteínas, e influencia a sinalização sensível ao estado redox e a apoptose. A atividade de PRDX3 se integra a sistemas antioxidantes mitocondriais, como tioredoxina 2/redutase de tioredoxina, e contribui para a manutenção da integridade mitocondrial sob estresse metabólico e inflamatório. Alterações na expressão ou na função de PRDX3 têm sido associadas a fenótipos de estresse oxidativo e são estudadas no contexto de distúrbios nos quais estão implicadas a desregulação redox mitocondrial, a sinalização de sobrevivência celular e a reprogramação metabólica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRX III (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PRDX3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PRDX3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PRDX3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRX III.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PRDX3 para a investigação da sinalização de PRX III, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PRDX3 críticos para a função PRX III
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PRDX3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PRX III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PRX III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PRDX3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PRX III Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PRX III (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PRDX3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PRDX3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.