Protein C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405598
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Protein C O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Protein C, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Protein C Anticorpo (C-10): sc-377175
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Protein C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405598 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PROC codifica a proteína C, um zimogénio de serina protease dependente de vitamina K, sintetizado no fígado, que circula como um regulador fundamental da hemostase. Após a ativação na superfície endotelial pelo complexo trombina–trombomodulina, a proteína C ativada inativa proteoliticamente os cofatores de coagulação Va e VIIIa, limitando assim a geração de trombina. Esta via anticoagulante é coordenada com o recetor endotelial da proteína C (EPCR) e com a proteína S, ligando o controlo da coagulação à inflamação vascular e à função de barreira. Alterações na expressão ou na função de PROC estão associadas a uma homeostase da coagulação desregulada e a fenótipos de doença trombótica, sustentando a sua utilização em estudos mecanísticos de sinalização da coagulação e biologia endotelial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Protein C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PROC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PROC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PROC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Protein C.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PROC para a investigação da sinalização de Protein C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PROC críticos para a função Protein C
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PROC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Protein C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Protein C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PROC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Protein C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Protein C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PROC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PROC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.