PROT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-408452

개요

SLC6A7은 PROT(프롤린 수송체)를 암호화하며, PROT는 SLC6 패밀리에 속하는 혈장막(세포막) 나트륨·염화물 의존성 수송체로서 L-프롤린을 고친화성으로 세포 내로 유입시키는 역할을 합니다. PROT는 세포 내 프롤린의 가용성을 조절함으로써 아미노산 항상성, 산화환원(redox) 균형, 그리고 특히 프롤린 대사가 엄격히 조절되는 신경 조직에서 글루타메이트 순환 및 미토콘드리아 생체에너지 대사와 같은 경로와의 대사적 연계를 좌우할 수 있습니다. 프롤린 수송 및 대사의 변화는 신경전달과 세포 스트레스 반응에 영향을 미침으로써 신경발달 및 신경정신과적 표현형과 연관되어 온 것으로 보고되었습니다. 따라서 SLC6A7은 수송체 생물학, 아미노산 의존적 신호전달, 그리고 프롤린 플럭스와 신경세포 기능을 연결하는 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

PROT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC6A7 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC6A7 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC6A7의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PROT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PROT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC6A7 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PROT 기능에 중요한 SLC6A7 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC6A7 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PROT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PROT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC6A7 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PROT HDR 플라스미드 (h) 및 PROT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC6A7 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC6A7 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.