PRMT7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431946

Visão geral

Prmt7 codifica a PRMT7, uma metiltransferase de arginina em proteínas do tipo III que catalisa a dimetilação simétrica em resíduos de arginina de substratos histônicos e não histônicos, moldando assim a organização da cromatina e os programas transcricionais. A atividade da PRMT7 se cruza com a regulação epigenética, o processamento de RNA e a sinalização adaptativa ao estresse, influenciando a especificação de linhagens e a manutenção da identidade celular em sistemas de mamíferos. Em modelos murinos, Prmt7 tem sido associado à regulação da função de células-tronco musculares, ao desenvolvimento neuronal e a respostas transcricionais relacionadas ao sistema imune, por meio da modulação da acessibilidade da cromatina e de redes de expressão gênica. A desregulação da metilação dependente de PRMT7 tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a fenótipos relevantes para distúrbios do desenvolvimento e metabólicos, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos do controle epigenético.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRMT7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prmt7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prmt7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prmt7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRMT7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prmt7 para a investigação da sinalização de PRMT7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prmt7 críticos para a função PRMT7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prmt7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PRMT7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRMT7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prmt7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PRMT7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRMT7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prmt7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prmt7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.