PRMT7 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-417516-ACT

PRMT7（protein arginine methyltransferase 7）はIII型PRMTの一種で、ヒストンおよび非ヒストン基質上のアルギニン残基のモノメチル化を触媒し、クロマチンのアクセス性やタンパク質間相互作用の形成に関与します。転写プログラム、RNA関連過程、細胞ストレス応答の制御を通じて、PRMT7は増殖・分化・DNA損傷関連シグナル伝達の制御に寄与します。PRMT7活性の変化は、がんに伴う転写リプログラミングを含む複数の疾患状況で観察される、エピジェネティック状態の破綻や経路リモデリングと関連付けられています。クロマチンおよび調節ネットワークと連携するメチルトランスフェラーゼとして、PRMT7は遺伝子発現制御機構やエピゲノム依存的表現型の研究で頻繁に解析されています。

PRMT7 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性PRMT7の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

PRMT7 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における PRMT7 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はPRMT7転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性PRMT7の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のPRMT7遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるPRMT7依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびPRMT7発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるPRMT7経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。