PRIM2A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422397

개요

Prim2는 Pol α–프라이메이스 복합체에서 DNA 프라이메이스의 큰 촉매 소단위인 PRIM2A를 암호화하며, 이는 선도 가닥과 지연 가닥 모두에서 DNA 복제를 시작하는 데 필요한 RNA–DNA 프라이머를 합성합니다. PRIM2A는 복제 기점 발화, 오카자키 절편 프라이밍, 그리고 S기 전반의 진행을 지원하며, 그 기능은 리플리좀 조립 및 DNA 폴리머레이스 전환과 긴밀하게 통합되어 있습니다. 프라이메이스 활성이 교란되면 복제 스트레스가 증가하고 복제 포크 안정성이 저하되며, DNA 손상 반응 및 체크포인트 경로에 대한 의존성이 커질 것으로 예상됩니다. 핵심 복제 인자로서 PRIM2A는 게놈 유지, 세포 증식 조절, 그리고 복제 결함이 게놈 불안정성과 연관된 질환 생물학으로 이어지는 기전을 연구하는 데 폭넓게 중요합니다.

PRIM2A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Prim2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Prim2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Prim2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PRIM2A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PRIM2A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Prim2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PRIM2A 기능에 중요한 Prim2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Prim2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PRIM2A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PRIM2A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Prim2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PRIM2A HDR 플라스미드 (m) 및 PRIM2A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Prim2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Prim2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.