PPOX CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422376

개요

Mouse Ppox는 헴 생합성의 말기 단계에서 프로토포르피리노겐 IX를 프로토포르피린 IX로 산화시키는 미토콘드리아 내막 효소인 프로토포르피리노겐 산화효소(PPOX)를 암호화한다. 포르피린 경로를 통한 대사 플럭스를 조절함으로써 PPOX는 산화적 인산화, 시토크롬 기능, 그리고 세포의 산화환원 항상성에 필요한 헤모단백질 생산을 뒷받침한다. PPOX 활성의 교란은 미토콘드리아 대사를 흐트러뜨리고 포르피린 중간체를 증가시킬 수 있으며, 이로써 헴 대사의 이 지점이 광과민성과 연관된 포르피린증 및 더 광범위한 산화 스트레스 표현형과 연결됨을 시사한다. 따라서 Ppox는 미토콘드리아 생물에너지학, 적혈계 분화 프로그램, 그리고 헴 가용성과 활성산소종(ROS) 처리 사이의 대사적 상호작용을 연구하는 데 관련성이 있다.

PPOX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ppox 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ppox 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ppox의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PPOX 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PPOX 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ppox 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PPOX 기능에 중요한 Ppox 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ppox 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PPOX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PPOX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ppox 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PPOX HDR 플라스미드 (m) 및 PPOX HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ppox 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ppox 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.