Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PP2A-Aβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428621
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP2A-Aβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP2A-Aβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP2A-Aβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-428621 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppp2r1b codifica a subunidade de andaime PP2A-Aβ da fosfatase de proteínas 2A, um complexo fosfatase central de serina/treonina que organiza subunidades catalíticas e regulatórias para controlar a especificidade e a localização dos substratos. A sinalização da PP2A molda processos dependentes de fosforilação, incluindo a progressão do ciclo celular, respostas a danos no DNA, dinâmica do citoesqueleto e modulação das vias MAPK/AKT. Ao ajustar eventos de desfosforilação em múltiplas redes, a PP2A-Aβ influencia a homeostase celular e a adaptação ao estresse em diversos tecidos. A desregulação de subunidades da PP2A, incluindo componentes de andaime, tem sido associada a alterações na sinalização proliferativa e na estabilidade do genoma, reforçando sua relevância em estudos mecanísticos de estados de sinalização associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP2A-Aβ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppp2r1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppp2r1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppp2r1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP2A-Aβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppp2r1b para a investigação da sinalização de PP2A-Aβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppp2r1b críticos para a função PP2A-Aβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppp2r1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP2A-Aβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PP2A-Aβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppp2r1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP2A-Aβ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PP2A-Aβ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppp2r1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppp2r1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.