POU2F3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417495

概要

POU2F3は、上皮細胞における系譜特異的な遺伝子発現プログラムを制御するPOUドメイン転写因子をコードしており、分化および特殊なtuft/brush細胞状態の維持において重要な役割を担います。オクタマー様モチーフに結合し、転写ネットワークを協調的に制御することで、POU2F3は上皮アイデンティティ、感覚関連シグナル伝達、ならびに粘膜バリア関連プロセスに影響を与えます。POU2F3活性の変化は、小細胞肺がんの亜型変異を含む一部の上皮由来がんにおいて、系譜可塑性やサブタイプ特異的な転写依存性と関連づけられています。マスター制御因子として、クロマチンに駆動される細胞運命制御や転写因子回路の再配線という文脈で、しばしば研究対象となっています。

POU2F3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPOU2F3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、POU2F3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、POU2F3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、POU2F3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、POU2F3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、POU2F3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• POU2F3の機能に不可欠なPOU2F3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、POU2F3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• POU2F3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPOU2F3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、POU2F3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  POU2F3 HDRプラスミド（h）および POU2F3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPOU2F3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPOU2F3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。