
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
POLDIP3 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-413603-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 POLDIP3(폴리메라아제 델타 상호작용 단백질 3)는 SKAR로도 알려져 있으며, mRNA 처리 과정을 번역과 연결하고 스플라이싱된 전사체가 효율적으로 발현되도록 지원하는 조절 인자입니다. POLDIP3는 RNA 대사와 리보솜 관련 과정에 관여하며, 특히 엑손 접합 복합체(exon junction complex, EJC) 연관 신호를 번역 산출로 연결(coupling)함으로써 세포 성장과 스트레스 반응성 유전자 발현 프로그램에 영향을 미칩니다. 이러한 활동을 통해 POLDIP3는 증식과 게놈 유지에 관여하는 경로에 영향을 주며, 암을 비롯한 증식성 또는 스트레스 관련 질환에서 관찰되는 번역 및 RNA 처리 이상을 연구하는 데 중요한 표적이 됩니다. 또한 전사 및 전사 후 조절과의 기능적 연결성 때문에, POLDIP3는 인간 세포에서 유전자 발현 조절을 분석하는 데 유용한 핵심 노드로도 평가됩니다.
POLDIP3 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 POLDIP3 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
POLDIP3 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 POLDIP3 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 POLDIP3 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 POLDIP3 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 POLDIP3 위치를 보존하고 내인성 위치에서 POLDIP3 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 POLDIP3 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 POLDIP3 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.