PMPCB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405207-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMPCBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PMPCB (h) e o Plasmídeo Double Nickase PMPCB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PMPCB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMPCB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405207-NIC | 20 µg | $410.00 |
PMPCB codifica a subunidade beta catalítica da peptidase de processamento mitocondrial (MPP), uma protease essencial que remove as pré-sequências de direcionamento N-terminais de proteínas codificadas no núcleo após a sua importação para a matriz mitocondrial. Esta etapa de processamento é indispensável para a maturação de proteínas mitocondriais, a biogénese da cadeia respiratória e a manutenção da fosforilação oxidativa e da homeostase metabólica. A função de PMPCB cruza-se com vias de importação mitocondrial e de proteostase, incluindo a coordenação com as translocases TIM/TOM e com chaperonas da matriz que orientam o dobramento e a montagem de precursores. A perturbação do processamento de pré-sequências mitocondriais está implicada em fenótipos de disfunção mitocondrial e tem sido associada a mecanismos de doença do neurodesenvolvimento e neuromusculares ligados ao metabolismo energético comprometido.
PMPCB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PMPCB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PMPCB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PMPCB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PMPCB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.